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產(chǎn)品名稱(chēng)

Takara cDNA文庫(kù)構(gòu)建試劑盒 cDNA Library Construction Kit

產(chǎn)品貨號(hào)

6136

產(chǎn)品品牌

Takara

買(mǎi)試劑，找華雅

作為T(mén)akara授權(quán)代理商，華雅思創(chuàng)生物致力于為科研人員提供高品質(zhì)的Takara cDNA文庫(kù)構(gòu)建試劑盒 cDNA Library Construction Kit。我們不僅提供 的產(chǎn)品，更提供全面的技術(shù)支持和服務(wù)，確保您的科研工作順利進(jìn)行。

產(chǎn)品名稱(chēng)

Takara cDNA文庫(kù)構(gòu)建試劑盒 cDNA Library Construction Kit

產(chǎn)品貨號(hào)

6121

產(chǎn)品品牌

Takara

買(mǎi)試劑，找華雅

華雅思創(chuàng)生物作為T(mén)akara授權(quán)代理商，為科研人員提供高質(zhì)量的Takara cDNA文庫(kù)構(gòu)建試劑盒 cDNA Library Construction Kit。我們不僅提供產(chǎn)品，還提供技術(shù)支持，幫助您實(shí)現(xiàn)科研目標(biāo)。

產(chǎn)品信息

Takara cDNA Library Construction Kit 是專(zhuān)為合成生物學(xué)研究設(shè)計(jì)的高效文庫(kù)構(gòu)建試劑盒。試劑盒包含了從RNA到雙鏈cDNA合成的所有試劑，包括PrimeScript™反轉(zhuǎn)錄酶、隨機(jī)引物、dNTPs和優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液。通過(guò)利用SMART™技術(shù)，該試劑盒能高效合成高質(zhì)量的cDNA，適用于后續(xù)的文庫(kù)構(gòu)建和高通量測(cè)序。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

1. 高效性：采用PrimeScript™反轉(zhuǎn)錄酶和SMART™技術(shù)，確?？焖俑咝У睾铣筛哔|(zhì)量cDNA。
2. 高保真度：合成的cDNA具有高保真度，確保文庫(kù)構(gòu)建的準(zhǔn)確性。
3. 應(yīng)用廣泛：適用于基因表達(dá)分析、克隆、NGS文庫(kù)構(gòu)建等合成生物學(xué)應(yīng)用。
4. 品牌保障：Takara品牌在 科研界享有盛譽(yù)，產(chǎn)品質(zhì)量和性能穩(wěn)定可靠。

選擇Takara cDNA文庫(kù)構(gòu)建試劑盒 cDNA Library Construction Kit，為您的合成生物學(xué)研究提供可靠的支持。買(mǎi)試劑，找華雅，華雅思創(chuàng)生物是您的信賴(lài)之選。

利用真核生物的各種組織或細(xì)胞中的Poly(A)⁺RNA合成cDNA，然后進(jìn)行基因克隆，這在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中被廣泛應(yīng)用。這一技術(shù)的使用，使基因的結(jié)構(gòu)解析及目的蛋白的表達(dá)等變得更為方便。
一般合成cDNA以及構(gòu)建cDNA Library的方法為： ① 合成與目的Poly(A)⁺RNA相互補(bǔ)的雙鏈cDNA；② 將雙鏈cDNA與細(xì)菌或病毒來(lái)源的載體進(jìn)行重組； ③ 將重組體導(dǎo)入細(xì)菌或真核細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行擴(kuò)增，構(gòu)建cDNA Library。構(gòu)建成的cDNA Library可以用于cDNA的解析，或者進(jìn)一步進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄或體外翻譯等。
本試劑盒原理采用了Gubler-Hoffman法 (Linker Primer法)，是一種可以控制克隆基因方向性的Directional Cloning法，其原理見(jiàn)下圖，具體說(shuō)明如下：
1. 利用反轉(zhuǎn)錄酶PrimeScript RTase和Oligo(dT)18 Anchor Primer^1,3-5)合成1st Strand cDNA。1st Strand cDNA合成時(shí)使用5-methyl dCTP。
2. E.coli RNase H使mRNA-1st Strand cDNA雜合體中的RNA形成Nick，再使用E.coli DNA Ploymerase和E.coli DNA Ligase將RNA鏈置換成DNA鏈，合成2nd Strand cDNA。
3. 使用T4 DNA Polymerase將雙鏈cDNA末端平滑化。
4. 與Adaptor連接后，使用Not I 進(jìn)行酶切。
5. 使用Spin Column除去短鏈cDNA。
6. 與Vector pAP3neo進(jìn)行連接 (Directional Cloning)。
7. 利用電刺激轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入大腸桿菌。
8. 確認(rèn)克隆效率及插入片段大小等。