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產(chǎn)品名稱：BioLife 202102 CryoStor  CS2  凍存液 100ml

產(chǎn)品貨號(hào)：202102

產(chǎn)品品牌：BioLife

產(chǎn)品產(chǎn)地：美國

產(chǎn)品規(guī)格：100ml

用途范圍：細(xì)胞培養(yǎng)

產(chǎn)品介紹：

BioLife Solutions CryoStor?是BioLife公司特別優(yōu)化的細(xì)胞凍存液，在極低溫度 (-70oC to -196oC)下準(zhǔn)備和保存細(xì)胞。預(yù)混DMSO，為細(xì)胞和組織的冷凍、儲(chǔ)存和解凍過程提供安全的保護(hù)環(huán)境。通過調(diào)控凍存過程的分子生物學(xué)反應(yīng)，無血清、蛋白或具有高細(xì)胞毒性的試劑

CryoStor CS5細(xì)胞凍存液特點(diǎn)

用于細(xì)胞和組織的高級(jí)生物保存液

預(yù)混DMSO

無血清、無蛋白

USP級(jí)高質(zhì)量成分、cGMP級(jí)生產(chǎn)

滅菌、內(nèi)毒素和細(xì)胞功能檢測

DMSO無血清細(xì)胞凍存液適用細(xì)胞

多種類型細(xì)胞，包括如肝細(xì)胞之類的敏感細(xì)胞

使用與凍存方法

1)將待凍細(xì)胞置于懸浮液中(機(jī)械或酶解)

2)細(xì)胞離心獲得細(xì)胞丸

3)清除上清液-注意:盡可能多地清除培養(yǎng)基，以減少CryoStor?解決方案。加CryoStor凍存液

4)隔離:添加冷(2-8°C)冷凍庫?

a.細(xì)胞濃度:0.5-10 × 106細(xì)胞/ml常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)方案(可能更高的[細(xì)胞])。

b.在CryoStor?-不需要添加添加劑。

5)預(yù)冷凍:細(xì)胞懸液在2-8°C孵育約10分鐘

6)成核:-70°C冷凍樣品(許多方案交替使用-70°C和-80°C)

a.對(duì)大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞系統(tǒng)使用受控速率冷凍(-1°C/min)或類似的方案。

b.冷凍裝置應(yīng)預(yù)冷至2-8℃。

c.樣品內(nèi)的冰成核(播種)應(yīng)在-5°c左右開始，使用受控速率冰箱上的液氮爆發(fā)程序，或在-70°c大約15-20分鐘后機(jī)械攪拌(輕拍或輕拍)冷凍/樣品容器。

d.使用容器的冷凍時(shí)間(-70°C)建議為3-4小時(shí)

7)儲(chǔ)存:將樣品儲(chǔ)存起來

a.樣品保存在液氮溫度下(-130℃以下)。

b.樣品在-80°C保存僅推薦短期保存(周至月)。

細(xì)胞復(fù)蘇解凍

8)解凍:樣品在37℃水浴中快速解凍

a.樣品融化時(shí)，要輕輕旋轉(zhuǎn)樣品，直到所有可見的冰全部融化。冷凍液中1ml樣品的解凍時(shí)間約為3分鐘。

b.不允許樣品在冷凍溫度(0-10°C)以上加熱。從浴中取出的冷凍瓶摸上去應(yīng)該是涼的。不建議被動(dòng)解凍。

9)稀釋細(xì)胞/ CryoStor嗎?立即與文化媒介混合

a.稀釋程序可以一步完成。

b.稀釋介質(zhì)應(yīng)在20℃~ 37℃之間。

c.推薦的稀釋比為1:10(樣品與培養(yǎng)基)或更高。

10)平板電池配置適當(dāng)

11)將細(xì)胞置于培養(yǎng)條件下或立即使用

12)解凍后24小時(shí)活力測定*

注意:為了獲得冷凍保存后細(xì)胞活力的準(zhǔn)確測量，應(yīng)在解凍后24小時(shí)進(jìn)行評(píng)估，并與未冷凍對(duì)照進(jìn)行比較。

*解凍后立即用膜完整性指標(biāo)(如臺(tái)盼藍(lán))對(duì)樣品進(jìn)行評(píng)估，用于樣品細(xì)胞產(chǎn)量和活力的比較分析，通常會(huì)導(dǎo)致對(duì)細(xì)胞存活率的嚴(yán)重高估。

活/死熒光測定或代謝測定(MTT或alamarBlue?)建議更準(zhǔn)確的活力評(píng)估。

也建議肉眼檢查貼壁細(xì)胞和細(xì)胞在培養(yǎng)基中“漂浮”

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